液相色譜儀系統(tǒng)
點擊次數(shù)：2377 更新時間：2018-03-27
液相色譜儀系統(tǒng)
器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉(zhuǎn)化為供的信號，常用器有紫外吸收、熒光、示差折光、化學(xué)發(fā)光等。
1.紫外見吸收器
紫外見吸收器（UVD）是HPLC中應(yīng)用zui的器之一，所有的液相色譜儀配有這種器。其點是靈敏度較高，線性范圍寬，噪聲低，適用于梯度洗脫，對吸收物質(zhì)限1ng，后不破壞樣品，用于制備，并能與器串聯(lián)使用。紫外見器的工作原理與結(jié)構(gòu)同一般分光光度計相似，實際上就是裝有活動地的紫外見光度計。
（1）紫外吸收器
紫外吸收器常用氘燈作光源，氘燈則發(fā)出紫外-見區(qū)范圍的連續(xù)波長，并安裝一個光柵型單色器，其波長選擇范圍寬（190nm～800nm）。它有兩個流通池，一個作參比，一個作丈量用，光源發(fā)出的紫外光照到流通池上，若兩流通池通過純的均勻溶劑，則它們在紫外波長下吸收，光電管上接受到的輻度相等，信號輸出。當(dāng)組分進(jìn)進(jìn)丈量池時，吸收的紫外光，使兩光電管接受到的輻度不等，這時有信號輸出，輸出信號大小與組分濃度有關(guān)。
局限：活動相的選擇受到限制，即具有紫外吸收的溶劑不能做活動相，每種溶劑有截止波長，當(dāng)小于該截止波長的紫外光通過溶劑時，溶劑的透光率降10%以下，因此，紫外吸收器的工作波長不能小于溶劑的截止波長
（2）光電二極管陣列器
也稱掃描紫外見分光器，是一種的光吸收式器。它采用光電二極管陣列作為元件，構(gòu)成多通道并行工作，同時由光柵分光，再進(jìn)到陣列式接收器上的波長的光信號，然后對二極管陣列掃描采集數(shù)據(jù)，得到吸收值(A)是保存時間(tR)和波長(l)函數(shù)的三維色譜光譜圖。由此及時觀察與每一組分的色譜圖相應(yīng)的光譜數(shù)據(jù)，從而迅速決定具有*選擇性和靈敏度的波長。
2．熒光器（fluorescence detector，F(xiàn)D）
熒光器是一種高靈敏度、有選擇性的器，能產(chǎn)生熒光的化合物。某些不發(fā)熒光的物質(zhì)通過化學(xué)衍生化天生熒光衍生物，再進(jìn)行熒光。其zui小濃度0.1ng／ml，適用于痕量分析；一般情況下熒光器的靈敏度比紫外器約高2個數(shù)目，但其線性范圍不如紫外器寬。
近年來，采用激光作為熒光器的光源而產(chǎn)生的激光誘導(dǎo)熒光器地增了熒光的信噪比，因而具有很高的靈敏度，在痕量和痕量分析中得到應(yīng)用。
3.示差折光器
示差折光器是一種濃度型通用器，對所有溶質(zhì)有響應(yīng)，某些不能用選擇性器的組分，如高分子化合物、糖類、脂肪烷烴等，用示差器。示差器是基于連續(xù)測定樣品流路和參比流路之間折率的變化來測定樣品含量的。光從一種介質(zhì)進(jìn)進(jìn)另一種介質(zhì)時，由于兩種物質(zhì)的折率不同就會產(chǎn)生折。只要樣品組分與活動相的折光指數(shù)不同，就被，二者相差愈大，靈敏度愈高，在濃度范圍內(nèi)器的輸出與溶質(zhì)濃度成正比。
4.電化學(xué)器
電化學(xué)器主要有安培、極譜、庫侖、電位、電導(dǎo)等器，屬選擇性器，具有電活性的化合物。目前它已在各種機(jī)和陰陽離子、生物組織和體液的代謝物、食品添加劑、環(huán)境污染物、生化制品、農(nóng)藥及藥等的測定中獲
得了的應(yīng)用。其中，電導(dǎo)器在離子色譜中應(yīng)用zui多。
電化學(xué)器的優(yōu)點是：
①靈敏度高，zui小檢丈量～般為ng，有目pg；
?、谶x擇性好，測定大量非電活性物質(zhì)中極痕量的電活性物質(zhì)；
③線性范圍寬，一般為4～5個數(shù)目；
④設(shè)備簡單，本錢較低；
?、菀子谧詣硬倏v。
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